Elektroforesis untuk apa, untuk apa dan bagaimana dibuat

Elektroforesis adalah teknik laboratorium yang dilakukan dengan tujuan memisahkan molekul sesuai dengan ukuran dan muatan listriknya sehingga diagnosis penyakit dapat dibuat, ekspresi protein dapat diverifikasi, atau mikroorganisme dapat diidentifikasi..

Elektroforesis adalah prosedur sederhana dan berbiaya rendah, yang digunakan dalam rutinitas laboratorium dan dalam proyek penelitian. Menurut tujuan dari elektroforesis, mungkin perlu untuk melakukan tes dan ujian lain untuk mencapai diagnosis, misalnya.

Untuk apa ini?

Elektroforesis dapat dilakukan untuk tujuan yang berbeda, baik dalam proyek penelitian dan dalam diagnosis, karena itu adalah teknik yang sederhana dan berbiaya rendah. Dengan demikian, elektroforesis dapat dilakukan untuk:

Identifikasi virus, jamur, bakteri dan parasit, dengan aplikasi ini menjadi lebih umum dalam proyek penelitian;
Tes ayah;
Periksa ekspresi protein;
Identifikasi mutasi, yang berguna dalam diagnosis leukemia, misalnya;
Menganalisis jenis hemoglobin yang bersirkulasi, yang berguna dalam diagnosis anemia sel sabit;
Nilai jumlah protein yang ada dalam darah.

Sesuai dengan tujuan elektroforesis, mungkin perlu untuk melakukan tes pelengkap lainnya agar dokter dapat menyelesaikan diagnosis.

Bagaimana itu dilakukan

Untuk melakukan elektroforesis itu perlu gel, yang dapat dari poliakrilamida atau agarosa tergantung pada tujuan, buffer dan tong elektroforesis, penanda berat molekul dan pewarna fluoresen, di samping peralatan lampu UV atau LED, juga dikenal sebagai transiluminator.

Setelah menyiapkan gel, objek khusus harus ditempatkan sehingga sumur dibuat dalam gel, yang populer disebut sisir, dan biarkan gel diatur. Saat gel sudah siap, cukup oleskan zat ke sumur. Untuk ini, penanda berat molekul harus ditempatkan di salah satu sumur, kontrol positif, yaitu zat yang diketahui apa itu, kontrol negatif, yang menjamin validitas reaksi, dan sampel yang akan dianalisis. Semua sampel harus dicampur dengan pewarna fluorescent, karena dengan cara ini dimungkinkan untuk memvisualisasikan pita pada transilluminator.

Gel dengan sampel harus ditempatkan dalam tong elektroforesis, yang berisi larutan buffer spesifik, dan kemudian perangkat dihidupkan sehingga ada arus listrik dan, akibatnya, beda potensial, yang penting untuk pemisahan partikel sesuai dengan muatan dan ukurannya. Waktu pengoperasian elektroforetik bervariasi sesuai dengan tujuan prosedur, dan dapat bertahan hingga 1 jam.

Setelah waktu yang ditentukan, dimungkinkan untuk melihat hasil proses elektroforesis melalui transiluminator. Ketika gel ditempatkan di bawah sinar UV atau LED, dimungkinkan untuk memvisualisasikan pola pita: semakin besar molekul, semakin kecil migrasi, semakin dekat ke sumur, sedangkan semakin ringan molekul, semakin besar potensi migrasi.

Agar reaksi divalidasi, perlu bahwa pita-pita kontrol positif divisualisasikan dan bahwa dalam kontrol negatif tidak ada yang divisualisasikan, karena jika tidak maka ini merupakan indikasi bahwa ada kontaminasi, dan seluruh proses harus diulang.

Jenis-jenis elektroforesis

Elektroforesis dapat dilakukan untuk tujuan yang berbeda dan, sesuai dengan tujuannya, beberapa jenis gel dapat digunakan, yang paling umum adalah poliakrilamida dan agarosa.

Elektroforesis untuk mengidentifikasi mikroorganisme lebih umum dilakukan di laboratorium penelitian, namun, untuk tujuan diagnostik, elektroforesis dapat digunakan untuk mengidentifikasi penyakit dan penyakit hematologi yang berevolusi dengan meningkatnya jumlah protein, menjadi jenis utama elektroforesis :

1. Elektroforesis hemoglobin

Elektroforesis hemoglobin adalah teknik laboratorium yang dilakukan untuk mengidentifikasi berbagai jenis hemoglobin yang beredar dalam darah, sehingga memungkinkan untuk mengidentifikasi adanya penyakit yang berkaitan dengan sintesis hemoglobin. Jenis hemoglobin diidentifikasi dengan cara elektroforesis pada pH tertentu, idealnya antara 8,0 dan 9,0, dengan pola pita yang diverifikasi yang dapat dibandingkan dengan pola normal, memungkinkan identifikasi adanya hemoglobin abnormal..

Apa itu dibuat untuk: Elektroforesis hemoglobin dilakukan untuk menyelidiki dan mendiagnosis penyakit yang berhubungan dengan sintesis hemoglobin, seperti anemia sel sabit dan penyakit hemoglobin C, selain berguna dalam membedakan thalassemia. Pelajari cara menafsirkan elektroforesis hemoglobin.

2. Elektroforesis protein

Elektroforesis protein adalah pemeriksaan yang diminta oleh dokter untuk menilai jumlah protein yang beredar dalam darah dan, dengan demikian, untuk mengidentifikasi penyakit. Tes ini dilakukan dari sampel darah, yang disentrifugasi untuk mendapatkan plasma, bagian dari darah yang terdiri, di antara zat-zat lain, protein.

Setelah elektroforesis, pola pita dapat divisualisasikan dan, selanjutnya, grafik di mana jumlah setiap fraksi protein diindikasikan, menjadi dasar untuk diagnosis.

Apa itu dibuat untuk: Elektroforesis protein memungkinkan dokter untuk menyelidiki terjadinya multiple myeloma, dehidrasi, sirosis, peradangan, penyakit hati, pankreatitis, lupus dan hipertensi sesuai dengan pola pita dan grafik yang disajikan dalam laporan pemeriksaan.

Memahami bagaimana hal itu dilakukan dan bagaimana memahami hasil elektroforesis protein.