Diagnosis molekuler untuk apa, untuk apa dan bagaimana hal itu dilakukan
Diagnosis molekuler sesuai dengan serangkaian teknik molekuler yang bertujuan untuk mengidentifikasi perubahan dalam DNA yang bisa menjadi indikasi penyakit genetik atau kanker, misalnya. Selain itu, teknik molekuler sedang banyak digunakan untuk identifikasi dan konfirmasi penyakit menular, karena mereka mewakili metode diagnostik yang lebih cepat dan lebih akurat..
Diagnosis molekuler mahal dan oleh karena itu tidak sering diminta oleh dokter, namun memberikan hasil yang akurat berkenaan dengan adanya perubahan, cara itu dapat mengganggu fungsi organisme dan respon pasien terhadap perawatan.
Untuk apa ini?
Diagnosis molekuler dapat dilakukan dengan beberapa tujuan, yang utama adalah:
- Identifikasi mutasi terkait dengan leukemia, seperti identifikasi translokasi BCR-ABL, yang merupakan karakteristik dari Leukemia Myeloid Kronis (CML);
- Mutasi karakteristik penyakit hematologi, seperti hemochromatosis herediter, polisitemia vera, trombositemia esensial dan trombofilia, misalnya.
- Perubahan molekuler yang mengindikasikan terjadinya kanker, seperti kanker kolorektal, paru-paru, payudara dan otak, misalnya;
- Diagnosis penyakit menular, seperti hepatitis, uretritis, toksoplasmosis, leishmaniasis, dll., selain itu Virus HPV.
Diagnosis molekuler, meskipun dianggap mahal jika dibandingkan dengan teknik diagnostik lainnya, lebih akurat, karena dapat menginformasikan perubahan mana yang terkait dengan penyakit tertentu dan tingkat pengaruh perubahan ini dalam organisme, sehingga membantu perawatan orang tersebut..
Selain digunakan untuk diagnosis beberapa penyakit, teknik molekuler juga digunakan untuk menilai tanggapan terhadap pengobatan, terutama pada orang dengan kanker, menjadi salah satu metode yang paling efektif untuk menunjukkan perkembangan dan kekambuhan penyakit..
Bagaimana itu dilakukan
Diagnosis molekuler dapat dilakukan dengan sampel apa pun, yang diminta oleh dokter yang paling dapat memberikan informasi tentang kondisi pasien, yang dapat berupa urin, saliva atau, dalam kebanyakan kasus, darah. Puasa atau persiapan lain tidak diperlukan untuk ujian.
Sampel dikumpulkan dan dikirim ke laboratorium bersama dengan bimbingan dokter menginformasikan ujian atau jenis penelitian yang harus dilakukan. Teknik molekuler yang dilakukan tergantung pada ujian yang diminta dan melibatkan serangkaian prosedur tepat yang bertujuan untuk mengidentifikasi ada atau tidaknya perubahan yang diminta oleh dokter..
Biasanya hanya sejumlah kecil sampel yang dikirim digunakan, sisanya disimpan sehingga, jika perlu, ujian diulang.
Lihat apa saja teknik molekuler utamanya
PCR
A PCR, kependekan dari Reaksi Rantai Polimerase atau Reaksi Rantai Polimerase, adalah teknik molekuler yang terdiri dari amplifikasi fragmen bahan genetik, baik DNA atau RNA, untuk mengidentifikasi mutasi dan, dengan demikian, membantu dalam diagnosis penyakit..
Teknik ini dibuat dari ekstraksi dan pemurnian bahan genetik, yang kemudian ditempatkan dalam campuran di mana salah satu komponen adalah enzim restriksi yang bervariasi sesuai dengan tes yang diminta dan yang fungsinya adalah memotong bahan menjadi fragmen. sehingga kemungkinan perubahan genetik dapat diidentifikasi. Campuran ditempatkan dalam thermocycler, yang merupakan alat yang bertindak melalui variasi suhu yang ditunjukkan oleh profesional sesuai dengan ujian dan, dengan demikian, memungkinkan amplifikasi fragmen genetik. Dalam kasus PCR konvensional, setelah amplifikasi, produk PCR dikenai elektroforesis, yang merupakan teknik molekuler berdasarkan berat dan ukuran fragmen, yaitu, sesuai dengan karakteristik ini, pola pita dihasilkan, yang analisisnya dibuat berdasarkan pita kontrol positif, yaitu pita yang dikenal yang sesuai dengan perubahan genetik.
A PCR waktu-nyata, juga disebut qPCR, itu adalah jenis PCR kuantitatif, yaitu, selain mengidentifikasi perubahan genetik, ia dapat memberikan informasi tentang ekspresi gen, yaitu, berapa banyak gen yang diubah diekspresikan dalam organisme, sehingga mampu menjadi digunakan untuk membantu diagnosis dan memantau perawatan. PCR waktu nyata tidak memerlukan elektroforesis, seluruh proses penguatan dan analisis materi genetik dilakukan oleh perangkat dan hasilnya ditafsirkan oleh seorang profesional kesehatan yang terlatih.
Sequencing
itu sequencing adalah teknik molekuler yang terdiri dari menentukan urutan nukleotida DNA, yang merupakan unit pembentuk materi genetik. Sekuensing terjadi dari reaksi yang mirip dengan PCR, namun, dalam campuran amplifikasi, nukleotida termodifikasi ditambahkan dengan penambahan fluorokrom, yang ketika bahan diamplifikasi, nukleotida termodifikasi dimasukkan ke dalam DNA dan menghasilkan beberapa fragmen, yang sesuai dengan produk sekuensing.
Produk reaksi ditempatkan dalam suatu alat yang disebut sekuensing DNA, di mana, ketika serpihan-serpihan itu dicapai oleh laser peralatan, fluorochrom tereksitasi, memancarkan fluoresensi, yang ditunjukkan oleh peralatan melalui puncak, dengan setiap puncak sesuai ke nukleotida. Pada akhir reaksi, peralatan akan menginformasikan urutan DNA, sehingga dapat membantu dokter dalam diagnosis penyakit genetik..
